Q 什么是外泌体?查看详情
A外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径30-150nm的胞外膜性囊泡(Extrocellular Visicles,EVs)。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富,包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,主要参与免疫抗原呈递,神经递质传递,脂类代谢,及细胞信号转导等过程,并与多种疾病的发生、发展、治疗及预后密切相关。
Q 外泌体分离后会有沉淀试剂留在纯化的外泌体中吗?如果有的话,会对下游实验产生影响吗?查看详情
A沉淀试剂不会吸附在外泌体上,所以沉淀试剂仍留在上清中,但如果在沉淀离心去除上清时没有完全的把上清除去的话,会留下少量的沉淀试剂在外泌体中,但含量很低,可以通过透析去除。
Q 用超速离心的方法分离细胞培养上清的外泌体,但是电镜下没有找到外泌体,什么原因呢?查看详情
A超速离心提取外泌体的量要低于外泌体沉淀试剂提取,更何况在细胞培养上清中外泌体的含量很低,所以分离出来的外泌体不容易找到,你可以 Nanosight analysis或者其他方法去证明你提取外泌体的含量。
Q 外泌体传统的分离方法是什么?查看详情
A传统的外泌体分离方法主要采用超速离心结合蔗糖密度梯度,将低密度的外泌体从其他囊泡中分离出来,但其操作流程复杂且耗时较长(大约需要8-24h),尽管这样,超速离心仍然是最为流行的外泌体分离方法。在过去的几年里,一些由于细胞培养基和各种体液的外泌体分离试剂盒已经商业化了,润基生物的外泌体提取和纯化试剂盒是一种操作方便,提取外泌体纯度高的外泌体提取工具,相信这款产品会越来越受欢迎。
Q 外泌体提取试剂盒的工作原理是什么?如何把外泌体分离出来?查看详情
A是通过一种聚合物将外泌体分离的,这种聚合物会破坏溶液中的水分子,使囊泡颗粒(包括外泌体)和一些较大蛋白质溶解度降低,通过低速离心就可以沉淀收集。
Q 我如何确保提取外泌体不是细胞内结构(如细胞碎片等)?查看详情
A当你从细胞培养基或各种体液分离外泌体前,首先需要经过样本预处理,样本先经过低速离心,就可以去除细胞和细胞碎片,处理后样本中只留有外泌体,囊泡和蛋白质。